故事讲述封印著中国三国时代人物的勾玉辗转流落到日本，并散落在高中学生手上;持有勾玉的人被称为“斗士”，他们会继承勾玉人物，为统一天下而战斗。人物被冠以日本化的汉名(表示方式为“姓名+字”)，校名使用古中国地名，主角为17岁的女高中生孙策伯符。在漫画十九集赤壁之战结束后，作品世界观开始不单局限三国人物，也开始出现一些日本战国时代的新角色。
动画版剧情简介如下：
第1季《一骑当千》：第1季
故事讲述孙策伯符首次登场，转学到南阳高中引起许多风波，并与乐就、吕蒙子明等斗士交手的过程开始激发了体内潜龙的霸王资质。而此时，洛阳高中首领董卓仲颖为了分画各学校的反抗势力，策办了大斗士大会的展开。
许多高校各自派出好手相互对战，但大斗士大会台面下却是暗潮汹涌，正有人为了扭转自身的宿命而开始策画连串的缜密布局...
第2季《一骑当千 Dragon Destiny》：DD
故事转以成都学园为中心。吕蒙子明与夏侯渊妙才潜入中国为争夺宝物龙玉而引发了南阳、成都与许昌三种势力间的争战。但成都学园首领刘备玄德却喜好读书不爱战斗，让身为重要伙伴的关羽云长及张飞益德大伤脑筋。
许昌学园首领曹操孟德勾玉中的魔王领魂逐渐苏醒并开始吞噬他的理智，性格因此变的狂暴嗜血，这点被企图一统天下的司马懿仲达利用，而展开对其他学园的征伐。而身为南阳学园新任首领的孙策伯符，日子仍旧过的悠哉无拘无束，还不知情三国史上著名的赤壁之战，在时隔1800年后又要再度引发...
第3季《一骑当千 Great Guardians》：GG
从这部动画开始，故事走向以原创故事为主。赤壁战后，南阳学园与成都学园结为友好，但左慈元放(王允子师)不知为何开始闪避著吕蒙子明，而在一天夜晚，在吕蒙子明以前出现的，却是本来应该早已死去的情敌，同时也是最强斗士的吕布奉先?
而这时，一名自称是孙策伯符妹妹的神秘美少女孙权仲谋却突然现身，孙策虽然对孙权的来历感到一头雾水，却仍把她当成亲妹妹般疼爱。然而，让王允子师突然变的行踪诡异的原因也开始揭晓，因为，真正的左慈元放竟然出现了...
第4季《一骑当千 XTREME XECUTOR(读音Extreme Executor)》：XX
许昌学园一天突然来了个斗士前来踢馆，而那名斗士自称是凉州学园的马超孟起，是为了替被曹操孟德害死的表兄韩遂文约复仇而来。马超的踢馆引起了许昌一阵轩然大波，虽然靠着许褚的努力才将马超逼退，但心灰意冷的马超竟因偶然加入了成都学园，并拜孙策为师?
这时，一名戴着面具，自称是献帝的神秘人物接触了南蛮学园的孟获与孟优姐妹，并搧动她们再度召开大斗士大会，她的目的究竟是...?
第五期OVA《一骑当千 集锷斗士血风录》：血风录
南阳、成都与许昌三所学园展开了校外旅行，目标是在关西地区进行战斗竞赛，打倒敌人抢夺对方的锷，并沿途享受各路的风景名胜。只是，在旅行最后，孙策却与关羽展开了激烈冲突...
第六期OVA《一骑当千 Extravaganza Epoch》：EE
故事走向转回漫画原作的战国篇。由持有古代战国武将转世勾玉，来自关西地区的全新角色为中心，开始进行关东地区三国斗士的勾玉掠夺战。不单传出关羽被人袭击而被揍的面目全非，清龙刀毁的流言，赵云也在竹林遇到持有妖刀一片石的神秘少女斗士柳生三岩。
源九郎义经与武藏坊弁庆的组合将许昌学园杀的狼狈不堪，就连成都学园也被宝藏院胤舜袭击的满目疮痍。而让关西斗士如此行动的幕后主谋卑弥呼，也将她的手伸向了还不知情的孙策...
第七期电视短编(全三集)‘一骑当千Western Wolves’：WW
关东关西斗士正式开战，而孙策和真正的妹妹孙权重逢。
